CaCo-2细胞模型法

CaCo-2细胞模型法评价SNAC对Semaglutide肠吸收影响的实验

方案草案

1、CaCo-2 细胞模型简介

CaCo-2细胞系人结肠腺癌细胞(the human colonadenocarcinoma cell line)是一种结构和功能类似于分化的小肠上皮细胞，具有微绒毛等结构，并含有与小肠刷状缘上皮相同的酶系统，也具有小肠上皮类似的胞饮功能，可以用来进行模拟体内肠转运的实验。在细胞培养条件下，CaCo-2细胞生长在多孔的可渗透聚碳酸酯膜上的细胞可融合并分化为类肠上皮细胞，形成连续的单层。

2、CaCo-2 细胞模型的运用

现代药物研发成功与否，与药物的代谢特性密切相关。人工合成和筛选的化合物已被大规模的高通量筛选所取代，无论是开发新药还是开发新的给药途径，化合物在体内的吸收特性都具有突出的地位。以往传统的体内药代吸收筛选模型，由于所需药物量大、难以批量化、耗时长以及费用高等弊端，已经无法满足现代新药的研发要求，因而开发新的快速、准确以及需药量少的药物吸收筛选模型已成为新药研发的必然趋势。被广泛采用的三种筛选方法是：大鼠原位单次灌注法、大鼠外翻肠囊法以及CaCo-2细胞模型法。其中，CaCo-2细胞模型法已经成为一种预测药物人体小肠吸收以及研究药物转运机制的标准体外筛选工具。

人类小肠上皮中的各种转运系统、代谢酶等在CaCo-2细胞中也有相同的表达，如细胞色素P450同工酶、谷氨酰胺转肽酶、碱性磷酸酶、蔗糖酶、葡萄糖醛酸酶。同时糖、氨基酸、二肽、维生素等多种主动转运系统在CaCo-2细胞中都有与小肠上皮细胞类似的表达，非常接近药物在人体内吸收的实际环境。

小肠上皮的代谢、受体介导的转运、p-gP对药物分子的泵出，均为酶学饱和的动力学。联合用药时，因为存在药物相互竞争的酶、载体或p-gP的作用，所以与单独给药时的生物利用度存在差异，这一相互作用可以通过CaCo-2细胞模型进行研究。尤其近年来发现p-gP成为药物吸收的一个重要生化屏障，它把进入细胞内的药物泵出，因此成为口服药物生物利用度低、波动大的一个重要影响因素。CaCo-2细胞具有p-gP的表达，非常适合用吸收机制的深入研究。

3、Semaglutide的口服吸收研究

已有文献报道，Semaglutide 5mg，SNAC150mg或300mg能显著增加Semaglutide在胃内的吸收，本研究运用CaCo-2细胞模型法探讨SNAC是否能够促进Semaglutide在小肠吸收。